病害侵染對苜蓿葉綠素含量變化的影響
苜蓿是一種富含蛋白質的多年生豆科植物,具有廣泛的生態適應性,是世界上廣泛種植的優良牧草,適口性好,被譽為“牧草之王”。栽培苜蓿一般包括紫花苜蓿、黃花苜蓿和雜種苜蓿。它具有抗旱、耐鹽堿、kangfengshadengtedian,qizuishishengtaiquweibanwendaihebanshirunqihouqu,woguodabufendiqu,youqishixibudiqujibeifangdiquweimuxushengchangshiyingqu。suizhemuxuzhongzhimianjidekuoda,muxubinghaiyijingchengweiyinqicaodituihua、減產、品(pin)質(zhi)下(xia)降(jiang)的(de)主(zhu)要(yao)原(yuan)因(yin)。尤(you)其(qi)是(shi)苜(mu)蓿(xu)白(bai)粉(fen)病(bing)日(ri)趨(qu)嚴(yan)重(zhong),極(ji)大(da)地(di)影(ying)響(xiang)了(le)苜(mu)蓿(xu)產(chan)業(ye)的(de)發(fa)展(zhan)。筆(bi)者(zhe)通(tong)過(guo)對(dui)苜(mu)蓿(xu)不(bu)同(tong)品(pin)種(zhong)感(gan)染(ran)白(bai)粉(fen)病(bing)後(hou)葉(ye)綠(lv)素(su)含(han)量(liang)的(de)測(ce)定(ding)分(fen)析(xi),旨(zhi)在(zai)闡(chan)明(ming)白(bai)粉(fen)病(bing)對(dui)苜(mu)蓿(xu)葉(ye)綠(lv)素(su)含(han)量(liang)的(de)影(ying)響(xiang),提(ti)出(chu)對(dui)實(shi)際(ji)生(sheng)產(chan)具(ju)有(you)指(zhi)導(dao)意(yi)義(yi)的(de)措(cuo)施(shi)。
供試品種為塞特、德寶、德福、三德利(均引自荷蘭),牧歌401、巨人201(均引自美國)。供試菌種為白粉菌,采自蘭煉農場試驗地,在室內6個苜蓿品種上繁殖保存。
選用無病種子,種植在裝有滅菌土的營養缽中,在溫室培養(室溫17℃左右)。於分蘖前接種白粉菌,以不接菌為對照,將處理與對照隔離培養。接菌後第20天和第25天分別測定葉片中葉綠素含量,每處理重複3次。
用751G型分光光度計測定(也可以利用葉綠素檢測儀直接測定):采集不同處理的苜蓿新鮮葉片,擦淨組織表麵汙物、剪碎(去掉中脈),混勻;準確稱取剪碎的新鮮樣品0.5 g,共3份,分別置於研缽中並加少量石英砂和碳酸鈣粉及2~3 ml 95%的乙醇研成勻漿,再加乙醇10 ml,繼續研磨至組織變白,靜置3~5min;將濾紙放入漏鬥中,用乙醇潤濕,沿玻棒把提取液倒入漏鬥中,濾入25 ml容量瓶中,用少量乙醇衝洗研缽、研棒、殘渣2~3次,最後連殘渣一起倒入漏鬥;用滴管吸取乙醇,將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中,直到濾紙和殘渣中無綠色,最後用乙醇定容至25 ml搖勻。把洗入的提取液倒入比色杯中,在665、649 nm波長下測定其消光度(O.D.)值,以95%乙醇為空白對照。按下式計算色素濃度及含量。![]()
葉綠素含量(mg/g)=(色素的濃度×提取液的體積×稀釋倍數)/樣品鮮重(g)式中Ca、Cb分別為葉綠素a和葉綠素b的濃度;D665、D649分別為葉綠體色素提取液在波長665、649 nm下的消光度。
對6個具有不同抗性的苜蓿品種的葉片進行的葉綠素含量測定結果(表1)表biao明ming,接jie種zhong前qian感gan病bing品pin種zhong與yu中zhong感gan品pin種zhong及ji抗kang病bing品pin種zhong的de葉ye綠lv素su含han量liang差cha異yi不bu顯xian著zhe,接jie種zhong白bai粉fen病bing後hou品pin種zhong間jian葉ye綠lv素su含han量liang差cha異yi顯xian著zhe,葉ye綠lv素su含han量liang隨sui接jie種zhong時shi間jian的de延yan長chang和he發fa病bing程cheng度du的de增zeng加jia而er顯xian著zhe降jiang低di。接jie種zhong後hou第di20天,中感品種和感病品種的葉綠素含量下降0.21~0.44 mg/g,抗病品種的葉綠素含量隻下降0.07 mg/g;接種後第25天,中感品種和感病品種的葉綠素含量下降0.58~1.19 mg/g,抗病品種的葉綠素含量下降0.41 mg/g,而er且qie外wai觀guan葉ye色se差cha異yi也ye很hen明ming顯xian。說shuo明ming葉ye片pian中zhong葉ye綠lv素su含han量liang與yu植zhi株zhu抗kang病bing性xing密mi切qie相xiang關guan。但dan是shi葉ye綠lv素su含han量liang與yu抗kang病bing性xing間jian的de定ding量liang關guan係xi及ji葉ye綠lv素su含han量liang能neng否fou作zuo為wei品pin種zhong對dui白bai粉fen病bing的de抗kang性xing鑒jian定ding指zhi標biao之zhi一yi,還hai有you待dai於yu進jin一yi步bu研yan究jiu證zheng實shi。

表1 不同苜蓿品種的葉綠素含量的測定結果



