自動型凱氏定氮儀測定蛋白質含量的試驗全過程
蛋dan白bai質zhi是shi人ren體ti中zhong一yi個ge重zhong要yao的de組zu成cheng部bu分fen,對dui人ren體ti的de監jian健jian康kang有you著zhe重zhong要yao的de影ying響xiang,同tong樣yang在zai其qi他ta生sheng物wu跟gen動dong物wu之zhi中zhong也ye是shi如ru此ci,所suo以yi蛋dan白bai質zhi含han量liang的de測ce定ding是shi一yi個ge非fei常chang重zhong要yao的de課ke題ti,今jin天tian我wo們men來lai說shuo說shuo用yong自動型凱氏定氮儀測定蛋白質含量的試驗全過程。
1 預消化及溫度控製因素
1.1預消化
在消煮前,如能對樣品進行預消化,則消煮時間可縮短。所謂預消化,就是提前ld將樣品稱好,放人開氏管中,加上催化劑及消煮液,反應12h,這樣可避免由於噴濺損失而給測定結果帶來的影響,這一點對含纖維素及脂肪高的樣品尤為重要,這類樣品的消煮液也要酌情多加。
1.2溫度的有效控製
在剛開始消煮時,一定要低溫,並在剛有發泡沸騰時就將開氏管從電爐上取下,讓其沸騰停止後再放上電爐,這樣不易因沸騰劇烈而導致開氏管壁粘上樣品,待高溫時形成炭粒而無法進人開氏管瓶底部消煮,使蛋白質損失。在消煮中,當開氏管內的樣品由黑色變為褐色時應將爐溫調低,或者將開氏管移到電爐子的邊緣,以防因爐溫太高而使小漏鬥被氣體頂掉,此點尤其在消煮土壤樣品時更應注意。
2 蒸餾中堿液皿的適度控製
在蒸餾時應根據加人消煮酸的多少來確定加人NaoH溶液量。堿液加少了,氮素沒有全部從消煮液中轉化出來,造成測定結果偏低;而堿液加人太多,又造成浪費。通過多年測試分析,我們認為加堿量是加酸量的5一6倍,堿的濃度為40%(WlW)。加堿量適中,在開始蒸餾後,消煮液呈黃褐色,但這個範圍很窄。在加人堿量不足時,溶液呈白藍色,太多時又呈藍色。
3 硫酸滴定液的濃度與樣品含氮且的關係
選用H2sO4標準溶液滴定蒸餾液時,其濃度的大小,取決於樣品含氮量的高低。兩者最終以適度的滴定體積來決定。適度的耗酸量控製在5.00耐左右,滴定體積太小,則誤差幾率增大,滴定體積太大,又浪費時間,降低工作效率,尤其是在大批量測定時更為突出。
4 體係的空白
每批次測定時都應有空白樣,用空白樣的消耗量來監測批次間的情況,一般空白消耗量在0.30時左右。如果硼酸接收液增加,則空白值也會有一些升高。如果空白值太高、太低,都要查找原因,否則會造成蛋白質測定結果的正負誤差。



