植物病害免疫學診斷技術是伴隨著醫學免疫學及動物醫學免疫學的不斷發展而發展起來的, 它是以抗原與抗體的特異性反應為基礎而發展起來的一種技術, 不僅迅速、可靠, 而且應用方便。早在 1918 年, 該技術就已經應用於植物病原細菌的檢測, 至今, 已經發展成為一門成熟的技術。非標記免疫分析又稱傳統免疫分析, 它是利用抗原-抗體反應後理化性質的變化對抗原抗體進行測定的方法。根據手段不同, 又可分為凝集反應
、沉澱反應
、補體結合反應
、免疫電泳等。標記技術克服了非標記技術靈敏度不高, 缺乏可供測量的信號等缺點。利用放射性
、熒光或酶等物質標記抗原或抗體, 再利用抗原抗體反應的特異性, 使得靈敏度大大提高, 同時檢測的方法和類型也有了更多的變化, 主要有熒光標記免疫分析、放射性標記免疫分析、發光免疫分析、免疫酶分析、免疫膠體金快速診斷技術。

它不僅具有免疫熒光法和放射免疫法的反應靈敏、特異性強的優點, 而且克服了常規血清學方法受病原菌濃度
、粒體形態和抗血清用量等限製的缺點, 是目前免疫測定中最常用的技術之一。目前, 植物病菌檢測儀己被廣泛用於生物學、醫學和農業等許多領域, 可成功的對病毒、真菌、細菌
、線蟲等抗原及抗體檢測, 從而對病害作出診斷。當標本中待測抗原濃度相當高時, 過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結合, 而不再形成夾心複合物, 所得結果將低於實際含量。鉤狀效應嚴重時甚至可出現假陰性結果。種方法所測定的抗原隻要有一個結合部位即可, 因此, 對小分子抗原的測定常用此法。該法的優點是快, 因為隻有一個保溫洗滌過程。但需用較多量的酶標記抗原為其缺點。

當抗原材料中的幹擾物質不易除去, 或不易得到足夠的純化抗原時, 可用此法檢測特異性抗體。如抗原為高純度的, 可直接包被固相。如抗原中會有幹擾物質, 直接包被不易成功, 可采用捕獲包被法, 即先包被與固相抗原相應的抗體, 然後加入抗原, 形成固相抗原。洗滌除去抗原中的雜質, 然後再加標本和酶標抗體進行競爭結合反應。間接法是檢測抗體最常用的方法。本法隻要更換不同的固相抗原, 可(ke)以(yi)用(yong)一(yi)種(zhong)酶(mei)標(biao)抗(kang)體(ti)檢(jian)測(ce)各(ge)種(zhong)與(yu)抗(kang)原(yuan)相(xiang)應(ying)的(de)抗(kang)體(ti)。但(dan)不(bu)如(ru)雙(shuang)抗(kang)體(ti)夾(jia)心(xin)法(fa)靈(ling)敏(min)性(xing)高(gao)。間(jian)接(jie)法(fa)的(de)優(you)點(dian)是(shi)隻(zhi)要(yao)變(bian)換(huan)包(bao)被(bei)抗(kang)原(yuan)就(jiu)可(ke)利(li)用(yong)同(tong)一(yi)酶(mei)標(biao)抗(kang)體(ti)建(jian)立(li)檢(jian)測(ce)相(xiang)應(ying)抗(kang)體(ti)的(de)方(fang)法(fa)。間(jian)接(jie)法(fa)成(cheng)功(gong)的(de)關(guan)鍵(jian)在(zai)於(yu)抗(kang)原(yuan)的(de)純(chun)度(du)。雖(sui)然(ran)有(you)時(shi)用(yong)粗(cu)提(ti)抗(kang)原(yuan)包(bao)被(bei)也(ye)能(neng)取(qu)得(de)實(shi)際(ji)有(you)效(xiao)的(de)結(jie)果(guo), 但應盡可能予以純化, 以提高試驗的特異性。

目前, 免疫分析發展狀況是多種方法並存, 相互競爭, 相互補充。非放射免疫分析相對放射免疫分析更具有綜合優勢和潛力, 發展速度更快。不管怎樣, 目前還沒有一種免疫分析技術是完美無缺的, 各種技術還需要不斷發展和完善, 並且人們還在不斷研究, 以開發出更新更理想的免疫分析技術。在進行病害診斷操作中, 診斷者要根據標本情況和實驗條件, 靈活選擇其中一種或兩種方法, 進行準確無誤的診斷。診斷的準確性既依賴診斷方法是否準確, 以及設備條件和標本處理情況; 又依賴診斷者的經驗、技能等。中國糧油儀器網    http://www.98fo.cn/