人工氣候室比較3種青枯菌接種方法效果
來源： http://www.98fo.cn 類別：實用技術 更新時間：2014-12-08 閱讀次
【本資訊由中國糧油儀器網提供】 鑒定高致病力的青枯菌菌株並采用簡便、高效、適用於田間大規模篩選的抗病性鑒定方法就成為抗病育種的關鍵。試驗對青枯菌菌株進行了生化型鑒定,於人工氣候室比較了3種不同的青枯菌接種方法,得出高致病力的菌株和較好的抗病性鑒定方法,為番茄青枯病育種提供指導。
試驗在人工氣候室進行,材料為5~6片真葉的生長期為35d的番茄幼苗，智能人工氣候室的溫度為28℃,相對濕度為80%。病組織采集自田間新發病的病症嚴重的植株,用剪刀剪取發病中心部位約10cm長的莖段。先用蒸餾水衝洗幹淨,再用75%的酒精表麵消毒。用滅菌的小刀或剪刀將其剪成每段3~4cm,然後均放入盛有200mL滅菌水的燒杯中浸泡1~2h。
從病組織橫斷麵向水中流出白絲狀的病原菌,確認懸浮液變混濁後,輕輕搖晃使其上下均勻,然後吸入到2mL的離心管中再用接種環沾取菌原液在TTC培養基上畫蛇線,放入人工氣候室培養室中30℃培養2d,觀察並挑選典型的單菌落(以下簡稱Rs)。形態學觀察典型的強致病力菌落呈不規則圓形略突起,乳白色中心淡粉紅色,周圍白邊較寬,具流動性。
觀察人工氣候室培養2d、7d、14d之後,看到培養基表麵的顏色均由橄欖綠色變為橙色,據此表明:智能人工氣候室試驗分離出的青枯菌菌株RS-42對6種不同的碳源均呈陽性反應,由此確定病原菌菌株為生化型。曾番茄試驗場的新鮮青枯病發病植株通過人工氣候室進行了病原菌的分離培養,用經典的傷根灌注法進行了人工接種試驗,在接種後1個月的時間內,隻有氣生根出現,沒有典型的青枯病葉片萎蔫病症發生。
試驗在人工氣候室進行,材料為5~6片真葉的生長期為35d的番茄幼苗，智能人工氣候室的溫度為28℃,相對濕度為80%。病組織采集自田間新發病的病症嚴重的植株,用剪刀剪取發病中心部位約10cm長的莖段。先用蒸餾水衝洗幹淨,再用75%的酒精表麵消毒。用滅菌的小刀或剪刀將其剪成每段3~4cm,然後均放入盛有200mL滅菌水的燒杯中浸泡1~2h。
從病組織橫斷麵向水中流出白絲狀的病原菌,確認懸浮液變混濁後,輕輕搖晃使其上下均勻,然後吸入到2mL的離心管中再用接種環沾取菌原液在TTC培養基上畫蛇線,放入人工氣候室培養室中30℃培養2d,觀察並挑選典型的單菌落(以下簡稱Rs)。形態學觀察典型的強致病力菌落呈不規則圓形略突起,乳白色中心淡粉紅色,周圍白邊較寬,具流動性。
觀察人工氣候室培養2d、7d、14d之後,看到培養基表麵的顏色均由橄欖綠色變為橙色,據此表明:智能人工氣候室試驗分離出的青枯菌菌株RS-42對6種不同的碳源均呈陽性反應,由此確定病原菌菌株為生化型。曾番茄試驗場的新鮮青枯病發病植株通過人工氣候室進行了病原菌的分離培養,用經典的傷根灌注法進行了人工接種試驗,在接種後1個月的時間內,隻有氣生根出現,沒有典型的青枯病葉片萎蔫病症發生。
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