fangcicanshizhongguobeifanghaishuiyangzhidexinxingzhonglei
，qiyingyangheyaoyongjiazhijiaogao，yineryangzhimianjibuduankuoda。siliaoshihaicanyangzhidewuzhijichu。suizhehaicanyangzhiyedexunsufazhan，duihaicansiliaodeyanjiuyuelaiyueshoudaorenmendeguanzhu。muqianyouguanfangcicanyoutihezhicanerliaodeyanjiujiaoduo
，danduiyoucanhechengcandeyingyangxuqiuyanjiushenshao。zhuweidengrenwei，fangcicanzhicansiliaozhongdanbaizhihezhifangdezuishihanliangfenbiewei18.21%~24.18%和5.0%。在zai他ta們men的de試shi驗yan中zhong以yi魚yu粉fen和he酪lao蛋dan白bai為wei蛋dan白bai源yuan，以yi稚zhi參can為wei研yan究jiu對dui象xiang
，而er對dui幼you參can在zai常chang用yong蛋dan白bai源yuan條tiao件jian下xia的de適shi宜yi脂zhi肪fang需xu要yao量liang尚shang未wei進jin行xing深shen入ru研yan究jiu。生sheng產chan上shang常chang因yin飼si料liao中zhong脂zhi肪fang添tian加jia量liang和he方fang法fa不bu當dang引yin起qi海hai參can化hua皮pi，也ye製zhi約yue了le對dui飼si料liao脂zhi肪fang含han量liang的de深shen入ru研yan究jiu。

     為此
，作者於2006年4月至6月研究了飼料蛋白質含量為19.8%時
，不同脂肪含量(試驗1)和乳化劑含量(試驗2)對(dui)仿(fang)刺(ci)參(can)幼(you)參(can)生(sheng)長(chang)和(he)體(ti)成(cheng)分(fen)的(de)影(ying)響(xiang)
，旨(zhi)在(zai)弄(nong)清(qing)幼(you)參(can)人(ren)工(gong)配(pei)合(he)飼(si)料(liao)中(zhong)脂(zhi)肪(fang)的(de)適(shi)宜(yi)含(han)量(liang)，為(wei)配(pei)製(zhi)幼(you)參(can)的(de)適(shi)宜(yi)飼(si)料(liao)提(ti)供(gong)參(can)考(kao)資(zi)料(liao)，飼(si)料(liao)中(zhong)的(de)脂(zhi)肪(fang)含(han)量(liang)利(li)用(yong)脂(zhi)肪(fang)抽(chou)提(ti)儀(yi)SZF-06進行控製，務必保證實驗的準確性。

1.1　材料

     試驗1中用的仿刺參取自大連水產學院養殖場，體質量平均為2.71 g
，暫養2周後，挑選480頭規格整齊、體色鮮亮

、體質健壯的仿刺參用弗苯尼考液消毒後
，隨機分成6組
，每組設4個重複，分別投喂6種不同脂肪含量的飼料。試驗在50L(45 cm×31 cm×30 cm)的塑料水槽中進行，每個水槽中放養20頭仿刺參。

     試驗2中用的仿刺參來源同上
，體質量平均為5.48 g。暫養2周後
，挑選健康仿刺參進行試驗，水槽規格同上。試驗分為4組，每組設4個重複
，分別投喂4種不同乳化劑含量的飼料。每個水槽中放養10頭仿刺參。

1.2　試驗飼料

     試驗1中投喂的飼料以魚粉
、蝦糠和玉米蛋白為蛋白源(表1)，蛋白質的質量分數為19.8%
；以深海魚油為脂肪源
，脂肪的質量分數分別為2.80%
、3.65%、4.50%
、5.35%、6.20%和7.05% (分別記為S1 ~S6組)
，添加脂肪含量10%的大豆卵磷脂作為乳化劑和黃原膠增稠劑。

     深海魚油乳化後先用玉米蛋白和貝殼粉作為第一稀釋劑
，混合研磨均勻
，然後逐步加入其它成分研磨、混合，再加入到飼料中。飼料中其它原料均經200目篩絹過濾
，除去上層，混合均勻
，做成粉狀混合物。使用前分別添加不同含量的深海魚油製成梯度飼料，低溫下貯存備用。投喂前用80℃左(zuo)右(you)的(de)熱(re)水(shui)攪(jiao)拌(ban)均(jun)勻(yun)，放(fang)置(zhi)至(zhi)室(shi)溫(wen)，待(dai)酵(jiao)母(mu)發(fa)揮(hui)作(zuo)用(yong)後(hou)成(cheng)為(wei)鬆(song)軟(ruan)合(he)適(shi)的(de)膏(gao)狀(zhuang)飼(si)料(liao)再(zai)投(tou)喂(wei)。投(tou)喂(wei)時(shi)將(jiang)飼(si)料(liao)均(jun)勻(yun)塗(tu)抹(mo)到(dao)波(bo)紋(wen)板(ban)上(shang)，放(fang)在(zai)水(shui)槽(cao)底(di)部(bu)

，並(bing)將(jiang)充(chong)氣(qi)石(shi)壓(ya)在(zai)板(ban)下(xia)，塗(tu)抹(mo)飼(si)料(liao)麵(mian)要(yao)朝(chao)上(shang)，以(yi)防(fang)止(zhi)飼(si)料(liao)被(bei)衝(chong)散(san)。

     飼料增稠後不易在槽中分散
，仿刺參攝食飼料後排出的糞便也呈規則的長條狀，不分散
，有利於殘餌和糞便的辨別和收集。

     試驗2中的飼料蛋白和脂肪含量分別為24%和5.0%，以大豆油作為脂肪源
，在脂肪中分別加入0
、5%
、10%和15%的大豆卵磷脂作為脂肪乳劑(分別記為f1~f4組)。飼料配方為(質量分數)：魚粉8.0%，蝦糠6.0%
，海泥28.3%，大豆油和卵磷脂2.1%，馬尾藻粉28%，貝殼粉5%

，玉米蛋白20%，複合維生素、礦物素1.2%，酵母、黏合劑1.2%
，抗氧化劑0.2%。其他成分均同試驗1。

1.3　飼養管理

     試驗1，采用經沉澱
、曝氣1d的自然海水，水溫為11.5~21.5℃。傍晚根據仿刺參的攝食情況過量投喂
，隔天收集殘餌和糞便。水溫高於16℃後
，傍晚投喂，第二天收集殘餌和糞便，換水。全天充氧
，水中溶氧量(DO) >7.0 mg/L；TNH3-N<0.1 mg/L。每20d稱量各箱中仿刺參總重，試驗開始和結束時，逐頭稱量仿刺參的體重
，中間稱量總重
，稱重前一天停止投喂。特殊增長率(SGR)的計算公式為

試驗2，在控溫條件下進行，水溫為11.5~14.5℃
，每5d換水一次
，每次換水量為2/3。抽取自然海水
，在室內控溫3d後加入水槽，全天充氧。試驗開始與結束時停食1d稱量總重。

1.4　樣品收集和指標測定

     在試驗1和試驗2的開始和結束時，從兩個試驗的各組中分別隨機取15頭和7頭仿刺參(置於-70℃下保存，同時處理和測定)，在75℃下烘至恒重
，分別用凱氏定氮法、索氏抽提法(以乙醚為抽提液)和馬福爐灼燒法(600℃， 6 h)測定粗蛋白
、粗脂肪和粗灰分含量；用氣相色譜儀分析脂肪酸種類和含量；用解剖稱量法測定髒壁比；用Cr2O3指示劑法測定脂肪消化率，其計算公式為

     其中：E和E′分別為飼料和糞便中營養物質的含量
； B和B′為飼料和糞便中Cr2O3的含量。

1.5　酶活性的測定

     試驗2結束時，測定各種酶的活力。方法是：從每個試驗組取仿刺參12頭，置於冰盤內
，解剖取出全部腸

，用去離子水清洗腸內含物後研磨離心
，取上清液
，每個平行組中每3頭參的腸混合樣品為一重複
，每個平行組設4個重複。腸道樣品置於-70℃下保存備用。按參考文獻的方法測定腸道中澱粉酶、蛋白酶、過氧化氫酶、脂肪酶的活性和超氧化物歧化酶(SOD)對底物鄰苯三酚的抑製率。

1.6　數據處理

     所有試驗數據用SPSS 13.0軟件進行相關性檢驗、方差分析和LSD多重比較。以P< 0.01為差異極顯著，P< 0.05為差異顯著。

2.1　試驗1

2.1.1　飼料中脂肪含量對仿刺參生長的影響　

     在60d的飼養過程中，除S3組在試驗初有1頭仿刺參化皮死亡外，其餘各組仿刺參無死亡和排髒現象，表明飼料中脂肪的含量對幼參的成活率和排髒率無顯著影響(P>0.05)。但飼料中脂肪含量對仿刺參的生長有顯著影響(P<0.05，表2)。整個試驗期間

，幼參的SGR隨飼料中粗脂肪含量的增加(S6組除外)而逐漸增加，且飼料中粗脂肪含量為6.20%時
，幼參的SGR達最大值，但當飼料中粗脂肪的含量增至7.05%時，幼參的SGR反而下降。試驗結束時
， S3組幼參的SGR與S6組間差異不顯著， S4組與S5組差異顯著(P<0.05)，表明幼參的適宜脂肪需要量為5.35% ~7.05%。二次回歸曲線表明，最大生長對應的脂肪含量為5.88% (圖1)。

     不同試驗階段水溫不同，仿刺參的生長速度即SGR也不同。前20d內，水溫為11.5~14.0℃，仿刺參個體較小
，剛開始活躍攝食，各組間的SGR值差異小
，雖然S2組和S3組生長較快，但各組間差異均不顯著(P>0.05)；第20~40 d內，水溫為14.0~16.5℃
，SGR增長明顯
，從第一個20d的平均1.0%升至第二個20 d的1.5%以上，其中S4組、S5組和S6組達到2.0%以上
，且S5組與S1組、S2組和S3組差異顯著(P<0.05)；試驗前40d內，S5組與S1組
、S2組、S3組和S6組差異顯著(P<0.05)；在最後20 d內，水溫為16.5~21.5℃，各組仿刺參生長緩慢，個別仿刺參甚至呈零增長或負增長，組內各重複箱中仿刺參的生長速度波動幅度較大，各組間差異不顯著(P>0.05)。

2.1.2　仿刺參幼參對飼料中脂肪的消化率　

     試驗期間，第20 ~40d，水溫為14.0~16.5℃
，仿刺參生長最快
，對脂肪的消化率具有代表性。此間，幼參對飼料中脂肪的消化率隨飼料中脂肪含量的升高而降低(表3)。zhifangxiaohualvzhinengbiaoshifangcicanduisiliaozhongzhifangdexiangduiliyonglv，bingbunengzhiguanfanyingfangcicanduisiliaozhongzhifangdeshijiliyonglv
，yincibenyanjiuzhongyongbiaoguanzhifangxiaohualvyusiliaozhongzhifanghanliangdechengjibiaoshifangcicanxishoudezhifangliang，weizhibiaoguanxiaohuazhifangzhansiliaohanliang。cizhizaisiliaozhongzhifanghanliang≤6.20%時隨飼料中脂肪含量的升高而升高，但當飼料中脂肪含量達7.05%時，反而降低。

      用Cr2O3法fa測ce定ding表biao觀guan脂zhi肪fang消xiao化hua率lv時shi需xu樣yang品pin極ji少shao
，計ji算suan步bu驟zhou複fu雜za

，誤wu差cha較jiao大da，且qie仿fang刺ci參can具ju有you隨sui時shi攝she食shi和he排pai便bian的de習xi性xing，對dui糞fen便bian的de及ji時shi收shou集ji造zao成cheng一yi定ding的de困kun難nan
；排出的糞便在槽中停留一天難免有一定的損失，也會影響測定結果。為了減少隨機取樣造成的誤差

，在收集糞便時將4個平行連續兩次投喂的糞便收集在一起，烘幹研磨後，取3次測定的平均值進行比較(表3)。仿刺參對飼料蛋白
、脂肪等營養物質的消化率低
，主要緣於仿刺參生理習性――食物在腸道內停留時間短。

2.1.3　飼料中脂肪含量對仿刺參體(含內髒)成分的影響　

     養殖結束時(水溫為21.5℃)

，測定了仿刺參內髒和體腔液之和與體壁之比。結果為0.40≤R≤0.55
，因體腔液造成數值誤差較大，稱量時盡量增大樣本數而未作統計分析。

     仿刺參體內脂肪含量與飼料中脂肪含量密切相關。隨著飼料中脂肪含量的增加
，仿刺參體內脂肪含量略有升高，但前5組之間差異不顯著(表4)(P>0.05)，僅S6組與其他組間差異顯著(P<0.05)
，表明飼料中脂肪的含量低於6.20%時，對仿刺參體內脂肪含量無顯著影響
；當飼料中脂肪含量高於7.05%時，仿刺參體內脂肪含量才顯著升高。各組仿刺參體水分含量和蛋白質含量差異均不顯著(P>0.05)。

      試驗始末仿刺參體內18：3n-3(LNA)的含量都低於0.5%。從圖2可見：試驗末仿刺參體內18： 2n-6 (LA)含量有部分增加
，20： 4n -6(AA)、20： 5n-3 (EPA)和22：6n-3(DHA)等脂肪酸含量均比初始(S0組)時大幅減少；試驗初仿刺參體內AA含量大於DHA和LA含量，試驗末DHA平均含量高於AA含量，LA平均含量接近AA含量，表明飼料中脂肪含量會影響仿刺參體內脂肪酸的組成。

     試驗初仿刺參體內EPA含量比其他3種脂肪酸含量高，試驗末保持了這一規律。試驗末仿刺參體內EPA含量明顯高於飼料中的含量(4.58% ~7.68% )，而且其含量變化也並非完全隨飼料中含量的增加而升高

，說明仿刺參體內EPA還受到其他成分的影響，可以由其他的成分轉化而成　仿刺參攝食含不同脂肪量的飼料時，體內4種脂肪酸的含量變化規律似乎雜亂，而4種脂肪酸之和由高至低依次為：S5組(32.96% ) > S4組(32.02% )>S3組(31.83% )>S2組(30.84% )>S6組(29.68% )>S1組(28.27% )(圖2)，含量規律基本與生長規律相同，即仿刺參的生長是伴隨著體內多不飽和脂肪酸含量的增高而加快的。

2.2　試驗2

2.2.1　飼料中乳化劑含量對仿刺參生長和酶活力的影響　

     飼料中添加不同含量大豆卵磷脂後，仿刺參腸道研磨液中脂肪酶活力低
，無法用普通的橄欖油乳化劑法檢測出
，蛋白酶
、澱粉酶、超氧化物歧化酶(SOD)和過氧化氫酶活力之間差異不顯著。

f3組的SGR顯著高於f4組(P<0.05) (表5)。

2.2.2　飼料中乳化劑含量對仿刺參生化組成和消化率的影響　

     從表6可見：飼料中添加乳化劑後，仿刺參體內水分
、灰分和脂肪含量差異不顯著； f1組的仿刺參體內蛋白質含量顯著高於f2和f3組，與f4組差異極顯著(P<0.01)。與魚類等水生動物相比，仿刺參體灰分含量較高(占身體幹重35%以上)，蛋白質含量較低(魚粉蛋白質含量為60%~70%)，蛋白質、脂肪和灰分之和占身體幹重83%以上。

     攝食添加不同劑量乳化劑飼料的仿刺參對飼料蛋白的表觀消化率差異不顯著，但f1組的仿刺參對飼料粗脂肪的消化率顯著低於f2、f3和f4組(P<0.05)，即ji飼si料liao中zhong添tian加jia乳ru化hua劑ji使shi刺ci參can對dui脂zhi肪fang的de消xiao化hua率lv提ti高gao。試shi驗yan中zhong沒mei有you發fa現xian仿fang刺ci參can排pai髒zang和he化hua皮pi現xian象xiang
，但dan在zai試shi驗yan末mo解jie剖pou測ce定ding髒zang壁bi比bi時shi，發fa現xian各ge組zu有you不bu同tong程cheng度du的de內nei髒zang萎wei縮suo、消失和次生小腸。f1~f4組仿刺參中無腸和次生小腸率分別為10%、5%、5%和10%

，還有個別中等大小的腸無法辨別是否曾經萎縮
，即說明添加乳化劑的f2和f3組效果優於f4組和不添加的f1組(表6)。各組仿刺參的髒壁比差異均不顯著(P>0.05)。

      綜合SGR
、脂肪消化率和乳化劑對抑製仿刺參腸萎縮的作用來看，飼料中乳化劑的適宜添加量為10%。

3.1　仿刺參飼料中脂肪的適宜含量

     不同水產動物對飼料脂類的需求量各異。商品對蝦飼料中脂類的推薦量多為6.0% ~10.0%；多數淡水魚類飼料中適宜的脂類含量為3% ~8%
，海水和半鹹水主要養殖魚類對脂類的適宜需要量多在10% ~13%。為了降低蛋白質的添加量，用特殊的加工方法，可將虹鱒Oncorhy-chusmysis和哲羅魚Hucho taimen等冷水魚類飼料中的脂類增加到20%以上。本試驗中，仿刺參幼參飼料中脂肪的最適含量為5.35% ~7.05%，最大生長對應的脂肪含量為5.88% (圖1)。由此可見，仿刺參幼參飼料脂肪的適宜含量接近對蝦
，高於朱偉等的研究結果(5.0%)
，與殼徑6~16mm的稚綠球海膽對飼料脂肪的需要量(6.0%)相近。

     仿刺參對飼料中脂肪的需要量不僅與種類、guigeheshenglizhuangkuangdengyouguan
，haishouhuanjingtiaojiandeyingxiang。benshiyanzhongcaiyongtianranhaishui，meitianquanbuhuanxinshui
，jibenfanyinglefangcicanzaizirantiaojianxiadeshengchangqingkuang。zaishiyanqian20d，水溫由11.5℃逐漸升至14.0℃，仿刺參生長較慢，攝食含不同數量脂類的飼料時
， SGR差異不顯著
，這可能是由於水溫較低，仿刺參需要適應試驗飼料和原來的體質差異所致。在試驗的第二個20 d
，仿刺參已適應了試驗飼料，水溫從14.0℃逐漸升至16.5℃，S5組(飼料脂肪6.20%)仿刺參的生長最快，其SGR顯著高於S1、S2、S3組(P<0.05)。在第三個20d內
，水溫為16.5 ~21.5℃
，各組仿刺參生長緩慢，各組間差異不顯著(P>0.05)。生長最快的S5組仿刺參3個階段的生長量分別占總生長量的25.59%
、64.10%和10.31%。一些學者的研究結果表明：仿刺參在水溫2~20.0℃下均可生長，在11~17℃下較為適宜，最適水溫為15~16℃，在這個時期仿刺參飼料中脂類的最適含量在6.0%左右。本試驗結果與上述結果相符。在遼寧和山東等地
，仿刺參的適宜生長期分別為5―7月和9―10月
，抓住這個有利飼養時期



，投喂脂肪和蛋白質含量適宜且營養平衡的飼料，能有效促進仿刺參的生長。

3.2　仿刺參飼料中乳化劑的作用

     為(wei)了(le)減(jian)少(shao)飼(si)料(liao)中(zhong)蛋(dan)白(bai)質(zhi)的(de)用(yong)量(liang)
，配(pei)製(zhi)能(neng)量(liang)與(yu)蛋(dan)白(bai)平(ping)衡(heng)的(de)飼(si)料(liao)，降(jiang)低(di)飼(si)料(liao)成(cheng)本(ben)，目(mu)前(qian)多(duo)采(cai)用(yong)特(te)殊(shu)的(de)飼(si)料(liao)加(jia)工(gong)成(cheng)型(xing)方(fang)法(fa)，盡(jin)量(liang)增(zeng)加(jia)飼(si)料(liao)中(zhong)脂(zhi)肪(fang)的(de)含(han)量(liang)。仿(fang)刺(ci)參(can)對(dui)油(you)脂(zhi)特(te)別(bie)敏(min)感(gan)，添(tian)加(jia)不(bu)當(dang)或(huo)過(guo)量(liang)常(chang)引(yin)起(qi)仿(fang)刺(ci)參(can)排(pai)髒(zang)或(huo)化(hua)皮(pi)，因(yin)此(ci)
，限(xian)製(zhi)了(le)仿(fang)刺(ci)參(can)對(dui)飼(si)料(liao)中(zhong)脂(zhi)類(lei)的(de)需(xu)要(yao)量(liang)。本(ben)試(shi)驗(yan)中(zhong)采(cai)用(yong)先(xian)將(jiang)油(you)脂(zhi)在(zai)10%卵磷脂中乳化後再添加的方法，顯著提高了脂肪的消化率，較好地解決了這一問題。

     大豆油中主要成分為飽和脂肪酸，深海魚油中高度不飽和脂肪酸含量豐富。試驗2飼料所用大豆油中添加了不同含量的乳化劑，均發現仿刺參有不同程度的腸萎縮現象；而試驗1末期
，即使是脂肪含量最高的S6組也沒有發現無腸和腸變小者，或者已經長出新腸而無法辨別。但在試驗2暫養階段，曾經發生過因未乳化的大豆油研磨不均勻造成其中1槽有1/4仿刺參排髒的現象；且因為玉米蛋白作為油脂第一稀釋劑，表麵油脂覆蓋率高


，在試驗2仿刺參殘餌中主要含黃色的玉米蛋白，而試驗1此種現象不明顯。據此筆者認為，仿刺參飼料中脂肪的含量引起仿刺參排髒或腸道萎縮的現象除與仿刺參身體狀態
、食欲、季節等因素密切相關外，還與脂肪的種類密切相關，豐富的高度不飽和脂肪酸(包含了動物生長所需的必需脂肪酸)能夠有效促進仿刺參的生長

，增強體質。試驗2中將水溫控製在仿刺參的適宜生長範圍之內
，仿刺參的SGR明顯低於試驗1，這也充分證明上述觀點。

     4種高度不飽和脂肪酸通常包含了海水魚類的必需脂肪酸，魚類對DHA的需求量高於EPA。仿刺參體內EPA的含量顯著高於其它幾種(圖2)，對EPA的需求量高於DHA成為仿刺參飼料的特點。試驗結束時，仿刺參體內4種(zhong)高(gao)度(du)不(bu)飽(bao)和(he)脂(zhi)肪(fang)酸(suan)的(de)含(han)量(liang)基(ji)本(ben)低(di)於(yu)試(shi)驗(yan)初(chu)體(ti)內(nei)含(han)量(liang)
，說(shuo)明(ming)試(shi)驗(yan)飼(si)料(liao)中(zhong)脂(zhi)肪(fang)酸(suan)成(cheng)分(fen)對(dui)仿(fang)刺(ci)參(can)的(de)符(fu)合(he)度(du)仍(reng)難(nan)以(yi)達(da)到(dao)試(shi)驗(yan)前(qian)仿(fang)刺(ci)參(can)天(tian)然(ran)餌(er)料(liao)的(de)成(cheng)分(fen)。但(dan)4種高度不飽脂肪酸在體內含量並非完全隨飼料含量同向變化，說明4種脂肪酸並非全部是仿刺參的必需脂肪酸。確定仿刺參飼料中必需脂肪酸成分及其含量成為下一步工作的研究重點。