葉綠素是一類與光合作用密切相關的色素。植物在光合作用時，所需的原料--光就是通過葉綠素吸收的，同時植物光合作用還需要二氧化碳、水分等物質，通過光的照射，合成植物能夠吸收利用的有機物。高等植物葉綠體中的葉綠素主要有葉綠素a 和葉綠素b 兩種（分子式： C40H70O5N4Mg）屬於合成天然低分子有機化合物。下麵介紹下如何提取植物葉綠素。當然如果我們需要測定葉綠素的含量
，我們推薦您使用葉綠素儀或者手持葉綠素儀，手(shou)持(chi)葉(ye)綠(lv)素(su)儀(yi)是(shi)可(ke)以(yi)帶(dai)到(dao)田(tian)間(jian)，拿(na)在(zai)手(shou)上(shang)測(ce)定(ding)植(zhi)物(wu)葉(ye)綠(lv)素(su)的(de)含(han)量(liang)的(de)。它(ta)是(shi)一(yi)款(kuan)小(xiao)巧(qiao)的(de)儀(yi)器(qi)
，隻(zhi)需(xu)將(jiang)葉(ye)片(pian)放(fang)在(zai)儀(yi)器(qi)的(de)一(yi)個(ge)帶(dai)有(you)光(guang)線(xian)的(de)位(wei)置(zhi)
，然(ran)後(hou)儀(yi)器(qi)的(de)顯(xian)示(shi)屏(ping)上(shang)就(jiu)能(neng)夠(gou)實(shi)時(shi)顯(xian)示(shi)植(zhi)物(wu)葉(ye)綠(lv)素(su)的(de)含(han)量(liang)。

1：把新鮮的葉子剪碎，放在燒瓶中，加水使之淹沒。用酒精燈加熱煮沸，倒去水後
，加入70～75％酒精（所加的量，仍以淹沒為宜）。zaipingkouchashangyigeboliloudou，bashaopingfangzaishuiyuguozhongjiarezhufei。ruomeiyoushuiyuguo，keyongdashaobeidaiti。youyuyezineidesesurongjiezaijiujingzhong，suoyishaopingneiderongyezhujianbianweishenlvse。ranhouguolv（過濾時

，濾紙要用70～75％的酒精潤濕，並且要緊貼在漏鬥壁上）。 取3毫升濾液放入一支幹淨試管

，再加入5毫升汽油和幾滴水，用大拇指按緊管口，上下搖動幾分鍾，在試管架上 放(fang)置(zhi)片(pian)刻(ke)後(hou)
，則(ze)溶(rong)液(ye)分(fen)成(cheng)上(shang)下(xia)兩(liang)層(ceng)，上(shang)層(ceng)是(shi)輕(qing)的(de)汽(qi)油(you)層(ceng)，主(zhu)要(yao)含(han)有(you)葉(ye)綠(lv)素(su)及(ji)胡(hu)蘿(luo)卜(bu)素(su)，故(gu)顯(xian)綠(lv)色(se)。下(xia)層(ceng)是(shi)酒(jiu)精(jing)層(ceng)，主(zhu)要(yao)含(han)有(you)葉(ye)黃(huang)素(su)，故(gu)顯(xian)黃(huang)色(se)。

2：製取葉綠素

萃取葉綠素的萃取罐一般用6毫米厚的鋼板焊接而成。

①萃取溶劑的選擇

萃取溶劑通常用高濃度丙酮為最佳，因為葉綠素極易溶於丙酮
，且丙酮的沸點低(56.2℃)，易濃縮也易回收。加熱濃縮時葉綠素熱分解物少

，產品色調好
，達到終點溫度低，時間短。

②萃取葉綠素的操作與條件

i．投料 投料前在抽提罐的鋼篩板上墊上竹篩或濾布。經試氣後確定無漏氣時，將軟化後的蠶糞由投料口投入。

ii．脫水 蠶糞水洗

、軟化需要水，但若含水較多，則一方麵使丙酮濃度降低，不易浸出葉綠素，相反地脂肪
、蠟份及一些水溶性色素卻會在其萃取液中增加其比例
；另一方麵
，由於萃取液丙酮濃度偏低，含水相對增多，對濃縮收糊造成困難。因此
，脫水這一步也是決定產品質量優劣的重要一環。

iii．萃取葉綠素 由於葉綠素在蠶糞(固相)與溶劑丙酮(液相)之間的分配是有一定規律的
，要實現葉綠素由固相向液相迅速轉換
，就必須控製好萃取的條件。

a．丙酮濃度 一般是96％以上為佳，丙酮濃度的調節有時也結合脫水程度
、萃取浴比等因素進行考慮。

b．萃取的時間和溫度 生產中萃取時既想提高葉綠素萃取率，又希望盡量縮短時間，以充分發揮設備的作用。縮短時間可以通過提高溫度、使用回流和增加丙酮的途徑來實現。

c．萃取液的pH值調節 蠶糞中含有氨
，而且往往混有石灰，因此萃取液呈堿性(pH7.5～8)這zhe樣yang可ke以yi保bao持chi葉ye綠lv素su的de穩wen定ding性xing，而er且qie可ke以yi避bi免mian設she備bei的de腐fu蝕shi。但dan鈣gai離li子zi的de存cun在zai會hui使shi葉ye綠lv素su形xing成cheng不bu易yi溶rong於yu丙bing酮tong的de葉ye綠lv酸suan鈣gai而er損sun失shi掉diao
，另ling一yi方fang麵mian
，丙bing酮tong在zai反fan複fu使shi用yong中zhong會hui受shou其qi影ying響xiang而er變bian質zhi。因yin此ci最zui好hao將jiangpH值調節在中性或微酸性範圍內。

③濃縮產品及溶劑回收

i．葉綠素蒸發濃縮的設備，即濃縮罐
，通常采用夾套式蒸發器。

ii．濃縮的操作與條件

a．操作 將jiang葉ye綠lv素su萃cui取qu液ye通tong過guo流liu量liang計ji注zhu入ru濃nong縮suo罐guan。通tong入ru蒸zheng氣qi於yu濃nong縮suo罐guan夾jia套tao中zhong，加jia熱re葉ye綠lv素su濃nong縮suo液ye，使shi丙bing酮tong受shou熱re蒸zheng發fa至zhi冷leng凝ning器qi冷leng凝ning
，以yi達da到dao回hui收shou溶rong劑ji之zhi目mu的de。丙bing酮tong蒸zheng發fa的de同tong時shi，葉ye綠lv素su萃cui取qu液ye開kai始shi濃nong縮suo
，用yong蒸zheng汽qi加jia熱re時shi，要yao經jing常chang注zhu意yi氣qi壓ya的de變bian化hua，以yi防fang止zhi溫wen度du突tu然ran升sheng高gao。當dang葉ye綠lv素su液ye濃nong縮suo到dao一yi定ding程cheng度du後hou

，可ke升sheng高gao溫wen度du，以yi便bian將jiang殘can留liu的de丙bing酮tong驅qu除chu。濃nong縮suo完wan成cheng後hou趁chen熱re放fang料liao
，冷leng到dao常chang溫wen時shi，葉ye綠lv素su呈cheng糊hu狀zhuang浮fu於yu表biao麵mian

，放fang去qu下xia層ceng黑hei褐he色se下xia腳jiao水shui，即ji為wei成cheng品pin。最zui後hou
，將jiang多duo批pi成cheng品pin攪jiao拌ban混hun合he4小時以上

，即可裝桶。

b．條件 蒸發濃縮的過程中

，混合液的沸點是隨著液體中溶質的濃度增大而逐步上升的，純丙酮的沸點為56.2℃，而葉綠素丙酮液的共沸點是不斷變化的。

控製共沸點不但能保證葉綠素的質量，而且與回收丙酮的濃度及濃縮物中的黃水濃度都有直接關係。

④產品收集

糊狀葉綠素比35％以下的稀丙酮輕

，且不溶於35％以(yi)下(xia)的(de)稀(xi)丙(bing)酮(tong)，因(yin)此(ci)

，懸(xuan)浮(fu)在(zai)濃(nong)縮(suo)液(ye)中(zhong)形(xing)成(cheng)懸(xuan)濁(zhuo)液(ye)，當(dang)我(wo)們(men)在(zai)放(fang)濃(nong)縮(suo)物(wu)的(de)時(shi)候(hou)，一(yi)定(ding)要(yao)慢(man)慢(man)放(fang)入(ru)
，並(bing)充(chong)分(fen)靜(jing)置(zhi)，使(shi)其(qi)糊(hu)水(shui)分(fen)離(li)，一(yi)般(ban)靜(jing)置(zhi)1小時以上。這樣既避免將糊從黃水(下腳水)中帶走，又保證了糊水分離效果好

3：我們在實驗室中提取葉綠素最簡便的方法就是用丙酮（濃度96%）乙醇（濃度98%）1：1混合液，將葉片浸在溶液中，放在暗處2小時
，便可提取的十分幹淨。

4：葉綠素的提取

▲ 將新鮮菠菜(Spinacia)葉片洗淨擦幹,去葉柄及葉脈.稱取樣品 8g,剪碎置研

缽內（加入少量碳酸鈣）,加入8cm3丙酮及少許固體碳酸鈉,迅速研磨成勻漿;然後再加入20cm3丙酮充分研磨.

▲ 在一玻璃漏鬥底部墊一小團脫脂棉,將勻漿通過脫脂棉過濾至已裝有20cm3石油醚

的分液漏鬥中,再用少量的丙酮衝洗葉片殘渣及研缽,合並濾液.

▲ 沿分液漏鬥的壁小心加入40cm3蒸鎦水,輕輕搖動,使色素轉移到上麵的石油醚層

靜置數分鍾,待分層清楚後棄去下麵的丙酮一一水層.如發生乳化現象可加入2-3cm3飽和

NaCl溶液.

▲ 在分液漏中再加入40cm3蒸鎦水,輕輕搖動,以洗去石油醚中殘留的丙酮,共洗兩

次.然後將葉綠素的石油醚提取液放入具塞錐形瓶中,置暗處或用黑紙包好備用。